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组培室建设中无菌室净化流程及注意事项

优质内容 来源:山东组培试剂公司 时间:2021-09-22 17:57:20 浏览:

  无菌操作,是指在无菌室或超净台中进行以防止微生物进入人体或污染供试菌的操作技术,在组培室建设中,无菌室净化流程及注意事项分别是什么,今天汉景生物来跟大家讲解一下

  组培无菌室净化流程:


组培室建设中无菌室净化流程及注意事项

  1、结构和布局合理,工作方便、节能、安全;

  2、按照工艺流程科学设计、经济、实用和创新。 组培净化车间选址要求避开污染源,例如避免与温室、微生物实验室、昆虫实验室相邻,水电供应应充足,交通运输便利。

  3、防止污染,控制住污染,就等于组织培养成功了一半;

  4、设置防止昆虫、鸟类、鼠类等动物进入的措施;

  5、管道要尽量暗装,安排好暗敷管道的走向,便于日后的维修并能确保在维修时不造成污染。

  6、组培车间的电源应由部门设计、安装并经验证合格之后方可使用,应有备用电源,确保停电或掉电时能继续操作。

  7、组培净化车间建造时,应采用产灰尘量少的建筑材料;

  8、墙壁、天花板、地面的交界宜做成弧形,便于日常清洁;

  9、洗手池、下水道的位置要适宜,不得对培养环境造成污染,下水道开口位置应对组培车间的洁净度影响小,并有避免污染的措施;

  10、接种室、培养室的装修材料必须经得起消毒、清洁和冲洗,并设置能确保与其洁净度相应的控温控湿的设施;

 

     无菌室净化注意事项

  操作时

  进行培养时,动作要准确敏捷,但又不必太快,以防空气流动,增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿,如已接触,要用火焰烧灼消毒或取备品更换。

  为拿取方便,工作台面上的用品要有合理的布局,原则上应是右手使用的东西放置在右侧,左手用品在左侧,酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性,组织或细胞在未做处理之前,勿过早暴露在空气中。

  同样,培养液在未用前,不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用,应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时,均应分别使用吸管,不能混用,以防扩大污染或导致细胞交叉污染。

  工作中不能面向操作野讲话或咳嗽,以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液时如吸管尖碰到瓶口,则应将吸管丢掉。

组培室建设中无菌室净化流程及注意事项

  培养前准备

  在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求,准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内,然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。
 

  洗手和着装

  原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时,可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时,因整个前臂要伸入箱内,应着长袖的清洁工作服,并于开始操作前要用75%酒精消毒手。

  如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。
 

  操作也消毒

  无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用).紫外线照射消毒30-50min,超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。

  在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线,消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

  体外培养细胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意,技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。
 

  火焰消毒

  在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时,首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作,如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等,都需在火焰近处并经过烧灼进行。

  但要注意:金属器械不能在为焰中烧的时间过长,以防退火,烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织,以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜,再用时会把有害物带入营养液中。

  开启、关闭长有细胞的培养瓶时,火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞。

  以上是从十个方面介绍了”组培室建设中无菌室净化流程“,并阐述了相关注意事项,从操作时,培养前准备,洗手和着装,操作时,火焰等消费都有详细的说明,希望本文对大家有帮助。
 

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